ConclusionsThe DMD model fish, sapj

Conclusions
The DMD model fish, sapje and sapje-like fish, are ideally suited for chemical screens aimed at identifying drug candidates that correct the dystrophin-deficiency induced muscle phenotype. 1) These fish are small enough to be permeable to small molecules, and can be assayed in large numbers. 2) Their muscle phenotypes are easily detectable by a birefringence assay to score chemical effects. For quick screening, pooled compounds were used for the first screening. Using these approaches, seven individual chemicals that decreased the percentage of muscle-affected fish have been identified by our group. Combining genotyping with dystrophin immunostaining to analyze the same fish after chemical treatment, provides a powerful means to assess the effects of drugs. We have identified 7 chemicals that can prevent the onset of abnormal muscle structure in dystrophin-null fish and result in an apparently normal fish, without restoring dystrophin expression. Recent reports in the literature have shown that selected compounds are able to cause exon skipping [ 23] or read-through [24] in mutant dystrophin cDNA and thus rescue the expression of truncated dystrophin. However, none of the seven chemicals identified in our screen restored dystrophin expression. We hypothesize that the chemical hits identified in our screen act on alternative proteins, thus potentially unraveling novel therapeutic pathways. The muscle structure of aminophylline-treated dystrophin-null fish appeared normal at 30 dpf. These results indicate that action of these chemicals may be able to restore dystrophin null muscle to normal muscle, without restoring dystrophin expression. Aminophylline has numerous anti-inflammatory effects, including the inhibition of inflammatory mediators [ 25, 26, 27 and 28]. Notably, other groups have previously reported that a PDE5 inhibitor restores mdx mouse dystrophic muscle to normal muscle [ 21, 29 and 30]. It is known that PDE inhibitors cause an increase in intracellular cAMP and/or cGMP. One of the pathways which are up-regulated by elevated cAMP levels is the PKA pathway [31]. Up-regulation of expression of target proteins following PKA activation might be able to modulate the progression of diseased phenotype in skeletal muscle. Our screening approaches can be utilized to screen numerous drug collections to identify candidate drugs for the treatment of muscular dystrophies. The analysis of the molecular mechanisms downstream of these drugs may unravel common pathways as well as pathways specific to each compound, thus facilitating the identification of novel targets and/or the development of novel therapeutics to treat human muscle disease.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

บทสรุปฝ่ายรุ่น sapje, sapje ปลาเหมือนปลาของพวกเขา ที่เหมาะสำหรับหน้าจอยาเคมีที่มุ่งเป้าไปที่การระบุผู้ที่มีกล้ามเนื้อถูกต้อง dystrophin ขาดกนิชักนำ- 1 เหล่านี้) ปลามี enoug ขนาดเล็กจะซึมเข้าไปได้จะโมเลกุลขนาดเล็ก และแน่ใจ บวก assayed ขนาดใหญ่ของพวกเขาสามารถเชื่อใน กล้ามเนื้อ 2 ตน) ไทป์จะตรวจได้ง่าย ๆ โดยวิเคราะห์สารเคมีได้คะแนน birefringence ผล ด่วนคัดกรองถูกพูสารประกอบที่ใช้ และ การตรวจคัดกรองครั้งแรก ใช้วิธีการเหล่านี้ สารเคมีแต่ละเจ็ดที่เปอร์เซ็นต์ลดลงของกล้ามเนื้อได้รับผลกระทบปลา - ได้รับการระบุ โดยกลุ่มของเรา รวม genotyping วิเคราะห์กับ immunostaining เดียวปลา dystrophin หลังเคมีบำบัด ให้มีความหมายมีประสิทธิภาพเป็นการประเมินผลกระทบของยาเสพติด เราได้ระบุสารเคมี 7 ที่สามารถป้องกันการโจมตีของโครงสร้างของ dystrophin ผิดปกติในกล้ามเนื้อผล null ปลาของพวกเขา - ในปลาผิดปกติเห็นได้ชัด โดยไม่ต้องคืน dystrophin นิพจน์ รายงานล่าสุดในวรรณคดีได้แสดงให้เห็นว่า สารประกอบที่เลือกจะสามารถทำให้ข้าม exon [23] อ่าน throug - หรือ [24] ดังนั้น การกลายพันธุ์ใน cdna ของนิพจน์ dystrophin การกู้ภัยของ dystrophin ตัด ไม่มี ของเป็นอย่างไรก็ตาม สารเคมีที่ระบุในหน้าจอของเราเจ็ดคืน dystrophin นิพจน์ เรา hypothesize ว่า ปริมาณการใช้สารเคมีของเราของหน้าจอเราได้จับเธอทำหน้าที่ในการระบุทางเลือกโปรตีน นวนิยายจึงอาจแก้รักษาโรคทางเดิน กล้ามเนื้อโครงสร้างของ dystrophin aminophylline - null - ถือปลาปรากฏปกติที่ 30 และ dpf ผลลัพธ์เหล่านี้บ่งชี้ว่า การกระทำของเหล่าสารเคมียุติธรรมแน่ใจว่าสามารถเป็น null เมื่อต้องการคืนค่าปกติของกล้ามเนื้อกล้ามเนื้อ dystrophin โดยไม่ต้องคืน dystrophin นิพจน์ aminophylline มีผลต้านการอักเสบที่มากมายของการยับยั้งของ a รวมอักเสบผู้ไกล่เกลี่ย [25, 26, 27, 28 การ] ยวด กลุ่มอื่น ๆ ที่มีก่อนหน้านี้รายงานว่า การยับยั้ง pde mdx dystrophic เมาส์ 5 กล้ามเนื้อให้คืนปกติกล้ามเนื้อ [21, 29, 30 ของพวกเขา] เป็น pde การรู้จักยับยั้งที่เพิ่มขึ้นทำให้เกิดใน intracellular ค่าย cgmp หรือเทียบ หนึ่งซึ่งมีวิถีของการควบคุม - ขึ้น โดยยกระดับระดับของทางเดินเป็นค่าย pka [31] ควบคุมการแสดงออกของเขาเป้าหมาย pka โปรตีนสามารถต่องานของ migt ชัดเจนปรับความก้าวหน้าของโรคกนิในกล้ามเนื้อลาย คัดกรองสามารถวิธีที่เราแน่ใจว่าใช้หน้าจอมากมายระบุยาเสพติดผู้สมัครสำหรับคอลเลกชันของยาในการรักษากล้ามเนื้อ dystrophies กลไกของโมเลกุลวิเคราะห์เป็นปลายน้ำของยาเหล่านี้ทั่วไปเป็นงานคลี่คลายด้วยวิถีทางเฉพาะของสารประกอบแต่ละ อำนวยความสะดวกดังนั้น รหัสของนวนิยายของเป้าหมาย พัฒนาการของนวนิยาย หรือ/ การบำบัดรักษาโรคของกล้ามเนื้อมนุษย์